液相色譜儀是一種常用的色譜分析儀器,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。可用于高沸點、熱穩(wěn)定性差以及具有生理活性物質(zhì)的分析。
什么是液相色譜儀
液相色譜儀是一種常用的色譜分析儀器,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
液相色譜儀的組成
由輸液系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等組成。
液相色譜儀的用途
可用于高沸點、熱穩(wěn)定性差以及具有生理活性物質(zhì)的分析。
液相色譜儀的工作原理
利用混合物各組分在固定相和流動相中溶解、分配或吸附等化學(xué)作用性能的差異,使各組分在作相對運動的兩相中反復(fù)多次受到上述各作用力而達到相互分離。
液相色譜儀的類型
(1)液液分配色譜儀。
(2)液固吸附色譜儀。
(3)離子色譜儀。
(4)凝膠色譜儀。
(5)親和色譜儀。
液相色譜儀的日常維護及注意事項
(1)泵
①放置了一天或以上的水相或含水相的流動相如需再用,需用微孔濾膜重新過濾;
②蠕動泵清洗瓶中的95%的水/甲醇或異丙醇要求每天更換。若液相使用頻率不高,建議每天使用前更換,以免水長細(xì)菌損壞泵中各組件;
③為了保證U3000泵的安全運行,必須設(shè)定高、低壓極限(一般安裝以設(shè)置好);
④流動相禁止使用氯仿、三氯(代)苯、亞甲基氯、四氫呋喃、甲苯等;慎重使用四氯化碳、乙醚、異丙醚、酮、甲基環(huán)己胺等,以免造成對柱塞密封圈的腐蝕。若需要使用正相系統(tǒng)分析樣品,需要另行安裝耐腐蝕的正相密封圈;
⑤擰松快速清洗閥時,不宜擰得過松。一般擰松2圈左右即可。擰得過松流動相容易從清洗閥部位流進泵頭中引起報警;
⑥使用快速清洗閥時,只能逐個通道的排氣泡,不得將幾個通道同時按比例排氣泡,比例閥的快速切換易導(dǎo)致?lián)p壞;
⑦流動相一定要過濾和超聲脫氣;
⑧詳細(xì)操作及注意事項可參考泵的硬件說明書。
(2)手動進樣閥或自動進樣器
①手動進樣閥每天做完樣后,一定要用甲醇沖洗定量環(huán)中的雜質(zhì)。若樣品為水系,則先用去離子沖洗定量環(huán)再用甲醇沖洗;
②手動進樣閥一定要注意不要使用不規(guī)范的過長的平頭針頭或普通的尖銳的針頭,易扎破六通閥中的墊片而導(dǎo)致漏液、進樣不準(zhǔn)確;
③自動進樣器建議用水和有機溶劑混合的不含鹽的溶液進行洗針,不要使用緩沖鹽;
④樣品必須要使用相應(yīng)的微孔濾膜過濾,以免堵塞進樣器的針頭或色譜柱;
⑤樣品瓶放置在自動進樣器的托盤之后,要檢查瓶子是否未放穩(wěn)或放歪,以免進樣時將針頭扎彎或變形;
⑥每天洗針前要更換相應(yīng)的流動相或洗液;
⑦盡量不要手動轉(zhuǎn)動進樣器的托盤,需要放置樣品或轉(zhuǎn)動樣品盤前請使用進樣器前面板的磁性筆觸控屏幕或在軟件中使用移動盤或瓶到前面來轉(zhuǎn)動樣品盤;
⑧重復(fù)使用樣品蓋時,請將含硅膠的一面朝下,以免硅膠粒堵塞進樣針。如何確認(rèn)哪一面是硅膠可以參考相應(yīng)的樣品蓋描述或說明書;
⑨其它使用和注意事項請考考進樣器的硬件說明書。
(3)柱溫箱
①柱溫箱一旦發(fā)生報警,一定要及時找到原因。若實驗室濕度太高,則需采取相應(yīng)的除濕措施。若柱溫箱中發(fā)生漏液現(xiàn)象,則需及時擰緊色譜柱并擦干漏液,長時間的漏液極易損壞柱溫箱中的傳感器;
②若實驗中使用了緩沖鹽或其它電解質(zhì),在做完實驗后,系統(tǒng)和色譜柱一定要充分清洗;
③柱溫箱使用溫控過程中,盡量不要打開前門,否則傳感器會報警出故障;
④柱溫箱的廢液管盡量不要與其它各部件的廢液管共用,避免造成濕度過高而報警。另外,廢液管一定不要有向上拐彎的部份,否則廢液或冷凝水會倒流;
⑤盡量避免在低流速下設(shè)定較高溫度,易造成色譜柱的塌陷或老化;
⑥主機的兩測盡量不要長時間放置揮發(fā)性的液體,以免造成柱溫箱傳感器報警;
⑦配有閥切換裝置的,在切換系統(tǒng)或切換閥之后要注意前一系統(tǒng)的影響??梢栽O(shè)定約3分鐘的平衡時間來完全消除(反相柱)。
(4)檢測器
①檢測器的紫外或可見燈在長期打開的情況下,一定要保證有溶液流經(jīng)檢測池。若不需要做樣,可設(shè)置一個較低的流速(如0. 1ml/min),不再使用儀器可關(guān)閉燈的電源;
②檢測器的燈一般是在流通池有溶液連續(xù)流動幾分鐘后才開的。如果流動池中有氣泡,則會提示漂移過大無法通過自檢和校正;
③檢測器的氘燈或鎢燈不要經(jīng)常開關(guān),每開關(guān)一次燈的壽命會損失幾十小時;
④連續(xù)兩次開關(guān)燈之間應(yīng)至少間隔15分鐘。否則燈過熱易導(dǎo)致燒壞;
⑤流動相中有緩沖鹽或酸堿時,樣品分析完后一定要清洗流通池,以防止流通池污染或堵塞;
⑥流通池的石英玻璃片在未被污染的情況下盡量不要拆下來清洗。若被污染需要清洗,一定要謹(jǐn)慎操作并咨詢售后服務(wù)工程師;
⑦檢測器需盡量避免震動,需搬動時,一定要采取有效的防震措施;
⑧對于VWD紫外檢測器,盡量避免長時間使用多波長同時檢測;
⑨對于CAD檢測器,在開泵前或停泵時保證流路的氣源是打開的。
(5)其它
①緩沖溶液與有機溶劑互相轉(zhuǎn)換前一定要用95%的去離子水清洗泵,防止鹽在有機相中結(jié)晶損壞泵中各組件和堵塞色譜柱;
②儀器使用前后一定要用甲醇或乙腈沖洗流路,平衡活化色譜柱,趕走管路中的雜質(zhì)和水分;
③ 緩沖溶液的濃度不能高于1. 0mol/L,pH范圍2~12(使用c18柱子時,pH范圍2~7);
④儀器長時間不用,每個泵通道和整個流路一定要用甲醇沖洗后保存,以免結(jié)晶或造成污染;
⑤各部分電源關(guān)機后再開間隔時間不易過短,應(yīng)至少15秒鐘,檢測器至少15分鐘。
應(yīng)用場景
液相色譜儀是當(dāng)今的熱門的實驗室儀器之一,被用在天然藥物化學(xué)、中藥化學(xué)等領(lǐng)域。
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