免疫反應抗體與抗原結合:在CLIA中,特異性抗體(通常是標記有酶的抗體)與待測樣本中的抗原(即目標分析物)結合。這種結合是高度特異性的,因為抗體是針對特定抗原設計的。形成抗原-抗體復合物:一旦抗體與抗原結合,就形成了抗原-抗體復合物。這個復合物是后續(xù)化學發(fā)光反應的基礎?;瘜W發(fā)光反應酶促反應:標記在抗體上的酶(如堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶)與特定的底物反應。這個反應通常需要特定的條件,如溫度、pH值等。發(fā)光物質的生成:在酶的作用下,底物被轉化為能夠發(fā)光的物質。這個過程涉及到化學能的釋放,轉化為光能。光信號的產(chǎn)生:當發(fā)光物質分解時,會釋放出光子,產(chǎn)生可見光或近可見光。這個光信號的強度與樣本中抗原的濃度成正比。光信號的檢測:化學發(fā)光產(chǎn)生的光信號被檢測系統(tǒng)(如光電倍增管或光電二極管)捕捉并轉換為電信號。數(shù)據(jù)分析:通過比較樣本產(chǎn)生的光信號與已知濃度的標準品產(chǎn)生的光信號,可以計算出樣本中抗原的濃度。這個過程通常由計算機軟件自動完成。
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