１．?。樱幔睿纾澹驕y(cè)序（鏈終止測(cè)序）

工作原理：

ＤＮＡ復(fù)制：首先，將待測(cè)序的ＤＮＡ片段通過(guò)ＰＣＲ（聚合酶鏈反應(yīng)）擴(kuò)增。

終止子添加：在ＤＮＡ復(fù)制過(guò)程中，使用帶有不同終止子的核苷酸（ｄｄＮＴＰｓ）。

鏈終止：當(dāng)ｄｄＮＴＰｓ加入時(shí)，ＤＮＡ鏈的合成終止，因?yàn)樗鼈儧](méi)有３羥基，不能與下一個(gè)核苷酸連接。

電泳分離：將所有新合成的ＤＮＡ鏈進(jìn)行電泳分離。

讀取序列：通過(guò)檢測(cè)每個(gè)ＤＮＡ鏈的終止點(diǎn)，可以確定每個(gè)核苷酸的序列。

２．　測(cè)序通量測(cè)序（二代測(cè)序）

工作原理：

片段化：將ＤＮＡ片段化成小片段。

文庫(kù)構(gòu)建：將片段化的ＤＮＡ連接到適配體上，形成文庫(kù)。

并行測(cè)序：使用熒光標(biāo)記的核苷酸進(jìn)行ＰＣＲ擴(kuò)增，并在每個(gè)循環(huán)中讀取序列。

序列讀取：通過(guò)檢測(cè)熒光信號(hào)的變化來(lái)確定每個(gè)核苷酸。

常見(jiàn)的二代測(cè)序技術(shù)包括：

Ｉｌｌｕｍｉｎａ測(cè)序：基于測(cè)序通量，使用測(cè)序芯片，通過(guò)熒光信號(hào)讀取序列。

ＡＢＩ?。樱希蹋椋臏y(cè)序：使用合成測(cè)序，通過(guò)檢測(cè)化學(xué)信號(hào)讀取序列。

Ｉｏｎ　Ｔｏｒｒｅｎｔ測(cè)序：使用半導(dǎo)體傳感器，通過(guò)檢測(cè)離子流讀取序列。

３．　單分子測(cè)序（三代測(cè)序）

工作原理：

單分子檢測(cè)：直接在單個(gè)ＤＮＡ分子上進(jìn)行測(cè)序，而不是像二代測(cè)序那樣先進(jìn)行片段化。

實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)：在ＤＮＡ復(fù)制或合成過(guò)程中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，可以同時(shí)讀取多個(gè)堿基。

信號(hào)檢測(cè)：通過(guò)檢測(cè)熒光信號(hào)或離子流等來(lái)讀取序列。

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